T-SPOT.TB اختبار السل المناعي

وفقا لتقديرات منظمة الصحة العالمية (WHO) ، يُصاب واحد من كل ثلاثة اشخاص في جميع أنحاء العالم بـ Mycobacterium tuberculosis العامل المسبب لمرض السل (TB). بالنسبة لهؤلاء الأشخاص ، هناك نسبة خطر حوالي 5 - 20٪ للإصابة بمرض السل خلال حياتهم.

لعقود من الزمان ، كان اختبار التوبركولين الجلدي فقط متاحا لتشخيص مرض السل الكامن. إن أوجه القصور في هذا الاختبار في تشخيص مرض السل معروفة جيدا بسبب الخبرة الطويلة في نظام الاختبار هذا. منذ عام 2005 ، أصبحت الاختبارات التي تجرى على الدم متاحة كبدائل لاختبار السلين الجلدي ، والتي تُعرف باسم مقايسات إطلاق إنترفيرون جاما (IGRAs) نظرا لطريقة عملها. إذا ما تم الكشف عن الخلايا اللمفاوية التائية الخاصة بالسل في الدم باستخدام IGRAs ، فهذا يشير إلى وجود عدوى كامنة أو نشطة بمرض السل عند المريض.

تستخدم معظم المختبرات الطبية اختبار T-SPOT.TB من شركة Oxford Immunotec ، وهو اختبار موثوق للغاية ولديه أعلى حساسية من باقي اختبارت IGRAs المتاحة. تحل IGRAs الآن إلى حد كبير محل الاختبار الجلدي .

مزايا اختبار T-SPOT.TB مقارنة باختبار السلين الجلدي

لا يتأثر الاختبار بلقاح BCG السابق.
تظهر نتيجة الاختبار بعد يوم واحد.
يحتاج المريض إلى زيارة العيادة أو المختبر الطبي مرة واحدة فقط لأخذ عينة دم.
لا تؤثر العدوى التي تسببها معظم أنواع المتفطرات غير السلية على اختبار T-SPOT.TB.
لا تتدخل التأثيرات الذاتية للشخص الذي يقوم بتفسير نتيجة التحليل (والتي يمكن أن تلعب دورا في تقييم اختبار الجلد ) في إجراء الاختبار .
أخذ قصة مرضية مفصلة من المريض حول مرض السل ، والذي قد يكون ضروريا لتقييم اختبار التوبركولين الجلدي ، غير مطلوب لتقييم اختبار T-SPOT.TB.
تكرارية عالية لنتائج الاختبار مع الاختبارات المتكررة.
يمكن أيضا استخدام الاختبار في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة (مثل فيروس نقص المناعة البشرية).

مبدأ عمل اختبار T-SPOT.TB

يتم الكشف عن الخلايا التائية الخاصة بمرض السل في الدم المحيطي. تؤدي مستضدات معينة من المتفطرة السلية إلى تنشيط الخلايا الليمفاوية التائية المستجيبة ، والتي تشكل مضاد للفيروسات γ ويتم اكتشافها باستخدام تقنية ELISPOT. إن نوعية وحساسية نظام الاختبار هذا عالية جدا عند حوالي > 98٪ و > 90٪ .

الاستخدامات و التطبيقات الممكنة لاختبار T-SPOT.TB

يعد الاختبار مناسبا بشكل خاص في حال وجوب استبعاد الإصابة بمرض السل:

توضيح الإصابة بالسل بعد التعرض لمريض مصاب بالسل المفتوح ، على سبيل المثال كجزء من الفحوصات البيئية.
فحص الأشخاص المعرضين لخطر متزايد للإصابة بالسل ، مثل الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية والأشخاص الذين يعانون من كبت المناعة والأشخاص في مناطق انتشار الإصابة بالسل.
الكشف عن السل الكامن أو استبعاده قبل اعطاء العلاج المثبط للمناعة ، على سبيل المثال عند استخدام مواد مثبطة لعامل نخر الورم ألفا TNF-alpha inhibitory لعلاج الروماتيزم.
فحص العاملين في مجال الرعاية الصحية لمرض السل الكامن.
غالبا ما يكون استبعاد الاصابة بمرض السل الكامن أثناء الإقامة في الخارج مطلوبا ، على سبيل المثال ، قبل الدراسة في الولايات المتحدة الأمريكية.
بعد إيجابية اختبار السلين الجلدي لاستبعاد تفاعل تبادلي مع المتفطرات غير السلية أو لقاح BCG السابق.
في حالة نتيجة اختبار السلين الجلدي السلبية والاشتباه السريري بالسل
كمعلومات إضافية في حالة الاشتباه السريري بالسل النشط.

وقت اجراء الاختبار

بعد التعرض لمصاب بالسل ، يشير اختبار السلين الجلدي إلى وجود عدوى بمرض السل بعد أسبوعين على أقرب تقدير وبعد 8 أسابيع على أبعد تقدير. يتم أيضا افتراض هذه الأوقات للكشف عن الإصابة باختبار T-SPOT.TB.
في مرض السل النشط ، يستمر التشخيص الميكروبيولوجي والسريري في أخذ الأولوية على اختبار T-SPOT.TB . نظرا لأن الكشف المباشر عن العوامل الممرضة غالبا ما يكون غير ممكن في حالات السل الرئوي والسل خارج الرئة ، يمكن أن تساهم نتيجة T-SPOT.TB الإيجابية في تشخيص مرض السل في هذه الحالات.

مزيد من مجالات التطبيق لـ T-SPOT.TB

يتطلب الاختبار عينة دم محيطي ، لكن يمكن استخدام مواد أخرى. في حالة الاشتباه في الإصابة بالتهاب الجنب السلي ، يمكن استخدام سائل بزل الجنب في اختبار T-SPOT.TB. إذا كانت النتيجة إيجابية ، يتم أيضا تحديد قوة الاستجابة المناعية الخاصة بالسل. إذا كان هناك استجابة مناعية أقوى بكثير في بزل الجنب مقارنة بالدم المحيطي ، فهذا يشير إلى تراكم الخلايا التائية الخاصة بالسل في موقع الإصابة وبالتالي التهاب الجنب السلي. هذا يمكن أن يحسن بشكل كبير تشخيص ذات الجنب السلي ، خاصة وأن اكتشاف العامل الممرض في هذه العدوى ممكن فقط في حوالي نصف الحالات .

يمكن إجراء اختبار T-SPOT.TB أيضا على مواد أخرى مثل سائل التامور وغسالة القصبات الهوائية والسائل الدماغي الشوكي.

تفسير نتائج اختبار T-SPOT.TB

نتائج الاختبارات الأربعة التالية ممكنة:

سلبي:

لا يمكن الكشف عن الخلايا اللمفاوية التائية الخاصة بمرض السل. لا يوجد حاليا أي دليل على الإصابة بمرض السل. بما أن حوالي 5-10٪ من مرضى السل لم يتم التعرف عليهم من خلال الاختبار ، فإن الاستبعاد الموثوق لمرض السل غير ممكن مع نتيجة الاختبار وحدها.

إيجابي:

هذا يشير إلى وجود عدوى كامنة أو نشطة بمرض السل. إذا كانت نتيجة الاختبار إيجابية ، فسيتم أيضا الإشارة إلى عدد الخلايا التائية الخاصة بـ ESAT-6 و CFP-10 التي تم قياسها في النتيجة. تعتبر مواصفات هذه الخلايا معلومات إضافية ولا يمكن استخدامها للتمييز بين السل الكامن والسل النشط.

على الحد الطبيعي أو قريب من الحد الاعلى للقيمة السلبية:

بعد التحفيز باستخدام الببتيدات الخاصة بمرض السل ، يكون عدد الخلايا التائية الخاصة بالعوامل الممرضة في نهاية الاختبار ؛ يجب تقييم نتيجة الاختبار على أنها حدية. بناءً على هذه النتائج ، لا يمكن استبعاد الإصابة بـ M. tuberculosis. تحدث نتائج هامشية في حوالي 3٪ من الاختبارات. يؤدي إعادة اجراء الاختبار كل 2-3 أسابيع إلى نتيجة واضحة في معظم الحالات.

لا يمكن تقييم نتيجة الاختبار:

تحدث هذه النتيجة عندما يكون التحفيز الكافي للخلايا الليمفاوية غير ممكن في مجموعات الكونترول في الاختبار أو عندما يكون هناك تحفيز مفرط غير محدد للخلايا الليمفاوية. النتائج التي لا يمكن تقييمها تحدث في حوالي 3٪ من الاختبارات. يمكن أن تكون الأسباب أوقات نقل العينة ووصولها للمختبر طويلة جدا ، ودرجات حرارة النقل مرتفعة جدا أو منخفضة جدا. حتى إذا كان المريض يعاني من مرض حاد مع جهاز مناعي خلوي نشط أو ضعيف ، فلا يمكن تقييم الاختبار. إذا تم تكرار اجراء الاختبار بعد 2-3 أسابيع ، فمن الممكن إجراء تقييم في معظم الحالات.

قيود على اختبار T-SPOT.TB

يكشف اختبار T-SPOT.TB الذي يجرى على عينة من الدم المحيطي عن وجود عدوى سلية لدى المريض. ومع ذلك ، لا يمكن للاختبار التفريق بين السل النشط والسل الكامن. على الرغم من أن قوة الاستجابة المناعية للسل في مرض السل النشط عادة ما تكون أقوى منها في العدوى الكامنة ، فإن هذا الاختلاف لا يكفي للتمييز الموثوق .

لا تسمح IGRAs باستخلاص أي استنتاجات حول وقت الإصابة بالسل. يمكن أن تكون العدوى قبل بضعة أسابيع ، لكنها قد تكون حدثت أيضا منذ عقود.

في حالة وجود عدوى سلية كامنة ، لا تقدم IGRAs أي معلومات حول خطر الإصابة بالسل النشط. أظهر الأشخاص المصابون استجابة مناعية قوية خاصة بالسل في IGRA السابق ، ولكن لا يمكن استخدام هذه الملاحظة للتشخيص الموثوق به لخطر الاصابة بالمرض.
لا يمكن استعمال هذه الاختبار (IGRAs) في مراقبة جدوى علاج السل مع . تقل قوة الاستجابة المناعية أثناء العلاج وبعده ، لكن هذا لا يرتبط بنجاح العلاج. بعد علاج السل الناجح ، تستمر IGRAs في إظهار نتيجة إيجابية عند معظم المرضى

العينة المطلوبة لاجراء الاختبار

بالنسبة لاختبار T-SPOT.TB ، نحتاج إلى 7.5 مل من الدم المسحوب حديثا على الهيبارين ، 5 مل تكفي للأطفال ، و 2-3 مل للأطفال الصغار
ويجب أن تصل المادة إلى المختبر في موعد لا يتجاوز اليوم التالي لأخذ عينة الدم. يتم نقل العينة في درجة حرارة الغرفة.
لا يمكن إجراء الاختبار على عينة مصل الدم (في هذه الحالة انبوب سحب الدم لا يحتوي على أي مانع تخثر) و الدم المسحوب على EDTA والبول واللعاب والبلغم.